【基础知识】何为荧光显微镜

      荧光显微镜在显微镜体系中的分类

1、按照光学系统划分，显微镜可以分为复式光学显微镜和体视光学显微镜两大类

2、其中，复式光学显微镜包含所有：正置、倒置显微镜

3、正置和倒置显微镜有如下照明方式和观察方式：明场（BF）、暗场（DF）、相差            （PH）、荧光（FL）、微分干涉（DIC）

激发块和滤光片

滤光片是荧光显微镜中最重要的部件之一，其主要功能是负责提供精准的激发波长        （EX）和发射光（EM）高效的截止。行业知名品牌的滤片有SEMROCK、CHROMA、   OHA-RAIF，顶尖品牌多采用磁控离子溅射技术来制造镜片的镀膜，其镀膜硬度与玻璃材质相当，不易受温湿度变化而退化。

       常规激发块滤光片参数指标

DAPI:

Spectrum

Single Band Exciter: 340-380nm

Single Band Emitter: 420-470nm

Dichroic: 400nm

FITC:

Spectrum

Single Band Exciter: 455-495nm

Single Band Emitter: 505-555nm

Dichroic: 500nm

TsRED:

Spectrum

Single Band Exciter: 545-575nm

Single Band Emitter: 595-665nm

Dichroic: 585nm

荧光显微镜的基本操作步骤

1.安装紫外线防护罩。

2.打开高压汞灯电源控制箱开关。

3.打开光阑光路。

4.预热5-10分钟。

5.将载有样品的载玻片放在载物台上。

6.选择物镜（按先低倍，后高倍的顺序）。

7.转动分光镜组件转盘，选择需要的分光镜组件：“O”为观察透射光；“WU”用于观察蓝色荧光（如DAPi）；“WB”用于观察绿色荧光（如FITC）；“TsRED”用于观察红色荧光（如TRITC）。

8.通过粗细螺旋调节焦距。

19.打开连接显微镜的电脑，点击数字成像系统软件，采集数字图像。